Информация
©Иванова А. К., Решетникова Д. А.
Научный руководитель: н.с. Соколова М.О.
Научно-исследовательский центр, научно-исследовательская лаборатория (тканевой инженерии)
Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова
Актуальность исследования
Солевой никотин может оказывать стимулирующее воздействие на образование злокачественных опухолей и нейродегенеративных заболеваний, способен вызывать аллергические и воспалительные реакции в легких и, в целом, деформировать и снижать пролиферативную способность клеток лёгких.
Цель исследования
Создать модель легкого курильщика in vitro и исследовать цитотоксическое воздействие раствора солевого никотина на культуру клеток легкого.
Материалы и методы
В исследовании использовалась популяция клеток легкого крысы, полученная при культивировании методом экспланта, эксперимент проводился в двух флаконах с клетками первого пассажа. В первый культуральный флакон было внесено 0,55 мг никотина (0,027 мл раствора) из расчета дозы, потребляемой при выкуривании одной сигареты — 20 мг/мл никотина. Второй флакон — контрольный. Клетки культивировались с использованием питательной среды Dmem F-12 с добавлением антибиотиков (пенициллин, стрептомицин), 10 % фетальной бычьей сыворотки и l-глутамина. Через каждые трое суток производилась частичная смена питательной среды, контроль контаминации, оценка морфологии клеток и конфлюэнтности и добавление новой дозы солевого никотина.
Результаты
Через трое суток после добавления раствора солевого никотина в клеточную культуру наблюдалось снижение пролиферации клеток легкого (конфлюэнтность 5 %), по сравнению с контролем (конфлюэнтность 10 %). Клетки имели деформированную цитоплазму, наблюдались единичные клетки в некрозе. На шестые сутки после введения первой дозы никотина, конфлюэнтность клеток уменьшилась до 2 %, в то время как в контрольном флаконе наблюдалось четырехкратное увеличение количества клеток. На девятые сутки численность клеток, получающих никотин стала меньше 1 %, подавляющее большинство клеток было в некрозе, оставшиеся клетки имели смещение ядерно-цитоплазматического соотношения в сторону цитоплазмы, клетки сильно вакуолизированы, дно культурального флакона покрывал клеточный детрит. Контрольная популяция клеток была представлена клетками различной морфологии (фибробласты, отростчатые клетки, клетки треугольной и округлой формы).
Выводы
Солевой никотин обладает выраженным цитотоксическим воздействием губительным для популяции клеток легкого. При курении в организм попадает доза никотина, которая приводит к необратимому снижению пролиферации клеток легкого, деформации и гибели клеток.
Литература
- Яблонский П. К., Суховская о. А. Влияние на здоровье вдыхания окружающего пара элек тронных средств доставки никотина // медицинский альянс. 2019. № 2. С. 99–103.
- Исследование влияния электронной сигареты (вейп) на дыхательную систему крысы в тече ние 30 суток / михайловский А. И. [и др.] // молодежь XXI века: шаг в будущее. 2017. № 18. С. 579–580.
